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货号：N30210
存储条件：4-30℃
1、纯化流程
1.1Buffer的准备
Buffer可使用下列推荐Buffer，也可根据自己的使用习惯配置不同的缓冲液体系，基本原理就是低咪唑上样，高咪唑洗脱，或者高pH上样，低pH洗脱。Buffer在使用前*好用0.22μm或者0.45μm滤膜过滤除菌。因为NiNTABeadsFF可以用于可溶蛋白和包涵体蛋白的纯化，两种方法所需Buffer不同
1.5SDS-PAGE检测
将使用纯化产品得到的样品（包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分）以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。
2、在位清洗
当填料使用过程中发现反压过高或者填料上面出现明显的污染时，需要进行在位清洗操作（Cleaning-in-Place，CIP）。在位清洗前，先把Ni2+脱掉（参见3.填料再生），清洗结束后，将填料保存在20%乙醇中，后者重新挂镍再保存在20%乙醇中。建议按照下面操作去除填料上残留的污染物，如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。
去除强疏水结合的蛋白，脂蛋白和脂类
通过使用30%异丙醇清洗5-10个柱体积，接触时间为15-20分钟可以去除此类污染物。然后，再使用10倍柱体积的去离子水清洗。也可以选择使用含有去污剂的酸性或碱性溶液，清洗填料2倍柱体积。例如，含有0.1–0.5%非离子去污剂的0.1M醋酸溶液，接触时间为1–2小时。去污剂处理后，需要使用70%的乙醇清洗5个柱体积，以彻di去除去污剂。*后使用10倍柱体积的去离子水清洗。
去除离子作用结合的蛋白
使用1.5MNaCl溶液接触时间为10-15分钟清洗。然后再使用去离子水清洗10个柱体积。
镍填料
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https://www.chem17.com/st534943/product_37801315.html
